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Ec UDG酶

簡要描述:Ec UDG酶可催化水解含有尿mi啶的 DNA 鏈的尿mi啶堿基和糖磷酸骨架的 N-糖苷鍵,釋放遊離尿mi啶。本尿mi啶 DNA 糖基酶(UDG)來源於(yu) 大腸杆菌 ung 基因,經重組表達與(yu) 多步蛋白純化而得。該酶分子量為(wei) 25KDa,催化含尿mi啶的單鏈和雙鏈 DNA 釋放遊離尿mi啶,對 RNA 無活性。

  • 產品型號:
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-11-30
  • 訪  問  量:2845

詳細介紹

品牌BIOHUB供貨周期兩周
應用領域生物產業
Ec UDG酶產品描述

UDG 酶可催化水解含有尿mi啶的 DNA 鏈的尿mi啶堿基和糖磷酸骨架的 N-糖苷鍵,釋放遊離尿mi啶。本尿mi啶 DNA 糖基酶(UDG)來源於(yu) 大腸杆菌 ung 基因,經重組表達與(yu) 多步蛋白純化而得。該酶分子量為(wei) 25KDa,催化含尿mi啶的單鏈和雙鏈 DNA 釋放遊離尿mi啶,對 RNA 無活性。

UDG 酶常用於(yu) 止 防止 PCR 擴增產(chan) 物的交叉汙染,其作用原理基於(yu) :在 PCR 反應中以 dUTP 替代dTTP 摻入 DNA 中,形成了含 dU 堿基的 PCR 擴增產(chan) 物,UDG 能選擇性斷裂單鏈和雙鏈 DNA中 U 堿基的糖苷鍵,降解 PCR 擴增產(chan) 物,消除上輪擴增產(chan) 物對新樣本的汙染問題。由於(yu) 大腸杆菌 UDG 經高溫失活,降溫到低溫後,活性會(hui) 部分恢複;因此不建議本酶用於(yu) 防止 PCR 擴增產(chan) 物的交叉汙染。建議利用本公司的熱敏 UDG(目錄號 AE0402)進行 防止 PCR 擴增產(chan) 物的交叉汙染。

Ec UDG酶產品應用

主要應用於(yu) PCR 擴增產(chan) 物的防汙染。它的作用原理基於(yu) :在 PCR 反應中以 dUTP 替代 dTTP摻入 DNA 中,形成了含 dU 堿基的 PCR 擴增產(chan) 物,UDG 能選擇性斷裂單鏈和雙鏈 DNA 中 U堿基的糖苷鍵,降解 PCR 擴增產(chan) 物,消除上輪擴增產(chan) 物對新樣本的汙染問題。

活性定義

37℃反應條件下,每分鍾催化 60 pmole 尿mi啶堿基從(cong) 含尿mi啶的雙鏈 DNA 上釋放所需要的酶量為(wei) 1 U。

質量控製

無內(nei) 切酶活性:50 U 的本酶和 1 μg 的 pBR322 DNA 在 37℃下反應 2 小時,DNA 的電泳譜帶不發生變化。

運輸與保存

幹冰運輸。-20℃保存,有效期2年。

注意事項

為(wei) 了您的安全和健康,請穿實驗服並戴一次性手套操作!

本產(chan) 品主要用於(yu) 科研領域,不宜用於(yu) 臨(lin) 床診斷或其他用途。

備注

長期儲(chu) 存 ( 非頻繁使用; 每月 1-2 次 ): -70℃;每天或每周使用: -20℃。盡量避免多次凍融,切勿暴露在溫度波動較大之處。溫度波動對產(chan) 品的穩定性有極大影響。

UDG 可以在 PCR 反應前清除不慎汙染的 U-DNA 分子,對於(yu) 某個(ge) PCR 擴增反應,整個(ge) 實驗室必須在所有的 PCR 反應中添加 dUTP,使所有擴增產(chan) 物都成為(wei) U-DNA。如僅(jin) 某次 PCR 擴增反應使用 dUTP,T -DNA 仍積累,這個(ge) 抗汙染係統也難以起到wan全的作用。

UDG/dUTP 係統是 PCR 試劑專(zhuan) 用的一種防汙染措施,為(wei) 了防止 PCR 產(chan) 物的汙染,尤其是在臨(lin) 檢實驗室中反複擴增同一片段時,必須嚴(yan) 格規範實驗室的區域劃分和操作。

如果經過換房間、紫外照射、DNase 消化等措施後,依然對某個(ge) 片段存在汙染,建議在不同的擴增區重新設計引物,以錯開汙染片段。

大腸杆菌 UDG 酶的反應溫度可以在 37℃-50℃ 的範圍內(nei) 變化,建議在 37 度反應,也可根據實驗需要在 37-50 ℃範圍內(nei) 自由調整反應溫度。

為(wei) 了您的安全和健康,請穿實驗服並戴一次性手套操作。

 

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