線性聚乙烯亞胺PEI MW25000

基本信息CAS：9002-98-6

分子式：(CH2CH2NH)n

分子量：25,000

熔點：73-75℃

溶解性：溶於(yu) 熱水，低pH值的冷水，甲醇和乙醇；

不溶於(yu) ：苯、、yi醚、丙酮

形式：白色固體(ti)

生物毒性：未知

安全防護：手套及口罩

存儲(chu) ：PEI 內(nei) 含自由氨基，建議開封後 4℃幹燥保存，減緩氧化過程。

效期：3年 

運輸：常溫

特點大量實驗數據反饋，細胞通用性好，有非常好的轉染效果，尤其對293，CHO細胞係有特別顯著的轉染效果。

配置方法

    1. 接種細胞： 轉染前一天，用膠原酶（BIOHUB Cat#78CL10002)消化細 胞並計數。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養(yang) 的器皿，每個(ge) 孔置 入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到 70~80%。

    2. 準備 DNA-PEI 複合物： DNA、PEI 試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升 至室溫。依據表 1 所示，用 Opti-MEM ITM或其他適合的無蛋白培 養(yang) 基稀釋適量 DNA。用同樣的培養(yang) 基稀釋 PEI 試劑。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 線 性 PEI 轉染試劑(這個(ge) 需要客戶自行摸索配比，每一批轉染試劑和每一批 DNA 比例可 能會(hui) 稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有 DNA 溶液的試管，一邊將稀釋的線性 PEI 轉染 試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻後，室溫靜置 10~25 min 以形成 DNA-PEI 複合物。當溶液體(ti) 積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如 NEST 5 mL /14 mL 離心管。

    3. 轉染細胞： 直接向每個(ge) 孔中加入 DNA-PEI 複合物並輕輕渦旋培養(yang) 板/培養(yang) 皿。在 無血清條件下轉染時，去除生長培養(yang) 基，替換成無血清培養(yang) 基，然後滴 DNA-PEI 複合 物。轉染 3 h 後，添加½體(ti) 積的包含 30%血清的生長培養(yang) 基。

    4. 孵育細胞和分析結果： 在 CO2 培養(yang) 箱中 37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染 後最快 7 h 即可檢測到轉入基因的表達。

    5. 轉染 24 h 後，將細胞傳(chuan) 代至新鮮的生長培養(yang) 基中（將細胞稀釋 10 倍 以上），在 CO2 培養(yang) 箱中 37℃孵育過夜。第二天加入與(yu) 轉染抗性基因相匹配的篩選藥物。約 1~2 周可 篩選到耐藥性克隆，在這期間需經常更換含篩選藥物的生長培養(yang) 基。

產(chan) 品背景

     BIOHUB 生產(chan) 的78Bio PEI是一種優(you) 化的線性陽離子聚合物轉染試劑,分子量分別為(wei) 25000 和 40000，78BioPEI40000 相比 25000 轉染效率高，但毒性也略大於(yu) 78PIE25000。在 HEK293 和 CHO 的蛋白表達係統中，相比於(yu) 市麵上的脂質體(ti) 78BioPEI 都表現出高的蛋白表達量（無 論是 96 孔板還是 100L 的細胞反應器），以及更小的細胞毒性、更高的轉染效和更高的可 重複性，並且十分經濟的高性價(jia) 比轉染試劑。產(chan) 品具有以下特點：

1.轉染效率高，細胞毒性低；  蛋白表達量高；

2.節約成本：BIOHUB 78 PEI轉染試劑 ，進口品質，親(qin) 民價(jia) 格，至少能夠降 40% 的轉染試劑總成本；

3.適用於(yu) HEK293 等真核細胞的轉染；

4.適用於(yu) 貼壁細胞和懸浮細胞的轉染；

5.適用於(yu) 有血清和無血清的轉染條件；

6. 無機試劑，無動物源成分；

7. 產(chan) 品穩定，質控嚴(yan) 格；

8. 工藝流程適用範圍廣，容易優(you) 化 適合小規模培養(yang) 板，培養(yang) 瓶到大規模的生物反應器。

注意事項

  1. 為(wei) 了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作。

  2. 本產(chan) 品主要用於(yu) 科研領域，不宜用於(yu) 臨(lin) 床診斷或其他用途。

  3.加熱或加酸都有助於(yu) 78BioPEI 溶解。當然酸可能不用加那麽(me) 多，詳細用量可試加一點 ,攪拌看看，足夠溶解就行，不一定需要加到 pH 那麽(me) 低。 

  4.一定要溶解充分，溶解不充分會(hui) 影響後續的轉染效率.

  5.冷凍後可能會(hui) 影響其後續轉染效果。