血清使用常見問題及應對辦法

血清使用常見問題和應對方法

1、血清保存的最好方法？

   血清最好保存在-20℃保存。若一次使用不完一瓶，建議無菌分裝於(yu) 適當的滅菌容器內(nei) 冷凍備用。

2、如何解凍血清，才能保證其質量不會(hui) 受損？

   我們(men) 建議將血清從(cong) 冷凍箱取出後，置於(yu) 2℃～8℃冰箱中解凍，然後在室溫下全融，解凍過程中必須規則地搖晃均勻，過大的溫差變化（-20℃～-37℃，溫差為(wei) 57℃），極其容易造成血清析出沉澱。

注意：從(cong) 低溫冰箱取出血清直接置於(yu) 56℃水浴中更是極其殘忍的做法，是對血清的不負責任，對科學規則的無情踐踏！

3、為(wei) 什麽(me) 血清在解凍後會(hui) 出現絮狀沉澱？應該怎樣處理？

   血清中絮狀沉澱產(chan) 生的原因有很多，其中zui普遍的還是由於(yu) 血清中脂蛋白的變性所致，而血纖維蛋白（形成凝血的蛋白之一）在血清解凍後，也會(hui) 存在於(yu) 血清中，這也是造成沉澱的主要原因，但這些絮狀沉澱並不影響血清本身的質量。欲去除沉澱，可采取自然沉降法或者將血清分裝於(yu) 無菌離心管中，以400-600G離心5min,上清液即可加入培養(yang) 基內(nei) 一起培養(yang) 。我們(men) 不建議用過濾的方法去除絮狀沉澱，因為(wei) 沉澱會(hui) 阻塞濾膜，造成過濾困難或無法過濾，另一方麵，過濾血清這種行為(wei) 可能會(hui) 導致血清中部分營養(yang) 成分的流失。

4、為(wei) 什麽(me) 要熱滅活血清？有必要熱滅活嗎？

   加熱可以滅活血清中的補體(ti) 係統，使補體(ti) 去活化。通常未滅活的補體(ti) 能夠刺激平滑肌收縮、肥大細胞和血小板組胺的釋放、激活淋巴細胞和巨噬細胞，同時還能夠參與(yu) 溶解細胞的過程。

  諸多研究表明大多數細胞的培養(yang) 無須進行血清的熱滅活；實驗研究顯示，經正確熱滅活處理的血清，對細胞的生長隻有微小的促進或wan全沒有促進作用，而通常因為(wei) 高溫處理影響了血清的質量，造成細胞生長速率降低。並且熱處理過的血清，沉澱物明顯增多，有會(hui) 使研究者誤以為(wei) 是微生物的分裂增殖，因此，我們(men) 建議，若非必須，可以不進行熱處理。而在免疫學研究和ES細胞、昆蟲細胞、平滑肌細胞的培養(yang) 過程中，推薦使用熱滅活血清。

5、如何避免沉澱物的產(chan) 生？

   建議您在血清使用的過程中，采用正確的解凍方法（冷凍→4℃→室溫），若血清解凍時改變的溫度太大（如冷凍→37℃）非常容易產(chan) 生沉澱物。溫度過高、時間過久、搖晃不均勻等，都會(hui) 造成沉澱增多，我們(men) 建議如非必要無須對血清進行滅活；若必須熱滅活，應嚴(yan) 格遵守56℃，30min的原則，並隨時搖晃均勻。

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