RNase A, from bovine pancreas 核糖核酸酶A，來源於牛胰腺說明書

產(chan) 品描述

核糖核酸酶A（Ribonuclease A，常用縮寫(xie) RNase A），來源於(yu) 牛胰，一種含4個(ge) 二硫鍵的單鏈多肽，分子量約為(wei) 13.7 kDa（氨基酸序列）為(wei) 高度專(zhuan) 一性核酸內(nei) 切酶。作為(wei) 一種核糖核酸內(nei) 切酶（endoribonuclease），特異性降解單鏈RNA上的胞嘧啶（C）或尿嘧啶（U）殘基。具體(ti) 來說，切割識別的是由某核苷酸上的5’-核糖和相鄰的嘧啶類核苷酸3’-核糖上磷酸基團形成的磷酸二酯鍵，從(cong) 而使得2’, 3’-環磷酸水解為(wei) 對應的3’-核苷磷酸（比如，pG-pG-pC-pA-pG經RNase A切割產(chan) 生pG-pG-pCp 和A-PG）。RNase A切割單鏈RNA活性最高，推薦工作濃度為(wei) 1-100 μg/mL，兼容於(yu) 各種反應體(ti) 係。低鹽濃度（0-100 mM NaCl），可用來切割單鏈RNA，雙鏈RNA，以及RNA-DNA雜交形成的RNA鏈。然而，高鹽濃度（≥0.3 M），RNase A僅(jin) 特異性切割單鏈RNA。

核糖核酸酶A（RNase A）最常見的應用在於(yu) 質粒DNA或基因組DNA製備過程中去除RNA，此製備過程中DNase酶活性的存在與(yu) 否是需要重視的汙染之一，可采用水浴煮沸這種傳(chuan) 統方法來滅活DNase活性。另外，本品還可用於(yu) RNA酶保護分析、RNA序列分析等分子生物學實驗。

產(chan) 品性質

使用方法使用方法

儲(chu) 存液製備

【注】：此為(wei) RNase A儲(chu) 存液配製的常用方法之一，也可以根據實驗室傳(chuan) 統的方法，或者參考文獻資料使用其他方法製備儲(chu) 存液（如直接溶於(yu) 10 mM Tris-Cl, pH7.5或者Tris-NaCl溶液）。

1）將RNase A溶解在10mM 醋酸鈉（pH5.2）中，製備成終濃度10 mg/mL 的RNase A 儲(chu) 存液；

2）100℃加熱15 min；

3）冷卻到室溫，加入1/10體(ti) 積的1 M Tris-HCl（pH7.4），調其pH至7.4（如：5 mL 10 mg/mL的RNase 儲(chu) 存液加入500 μL 1 M Tris-HCl, pH7.4）；

4）分裝於(yu) -20℃凍存，可穩定保存長達2年。

【注】：在中性條件下煮沸RNase A溶液，會(hui) 有RNase沉澱形成；在更低的pH下將其煮沸，如有沉澱可以觀察到，可能由於(yu) 蛋白雜質存在造成。煮沸之後若發現沉澱，可通過高速離心（13,000 rpm）去除雜質，然後分裝凍存。

運輸及保存方法冰袋運輸。-20℃幹燥保存，有效期2年。

注意事項

1）RNase A會(hui) 強吸附在玻璃器皿上，建議溶液裝到塑料離心管內(nei) 。

2）對於(yu) 同時操作完整RNA實驗的研究人員，一定要謹防RNase A引入幹擾試驗結果的準確性。

3）為(wei) 了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作。
4）本產(chan) 品僅(jin) 作科研用途！