Ec UDG酶說明書

UDG 酶可催化水解含有尿嘧啶的 DNA 鏈的尿嘧啶堿基和糖磷酸骨架的 N-糖苷鍵，釋放遊離尿嘧啶。本尿嘧啶 DNA 糖基酶（UDG）來源於(yu) 大腸杆菌 ung 基因，經重組表達與(yu) 多步蛋白純化而得。該酶分子量為(wei) 25KDa，催化含尿嘧啶的單鏈和雙鏈 DNA 釋放遊離尿嘧啶，對 RNA 無活性。

UDG 酶常用於(yu) 止 防止 PCR 擴增產(chan) 物的交叉汙染，其作用原理基於(yu) ：在 PCR 反應中以 dUTP 替代dTTP 摻入 DNA 中，形成了含 dU 堿基的 PCR 擴增產(chan) 物，UDG 能選擇性斷裂單鏈和雙鏈 DNA中 U 堿基的糖苷鍵，降解 PCR 擴增產(chan) 物，消除上輪擴增產(chan) 物對新樣本的汙染問題。由於(yu) 大腸杆菌 UDG 經高溫失活，降溫到低溫後，活性會(hui) 部分恢複；因此不建議本酶用於(yu) 防止 PCR 擴增產(chan) 物的交叉汙染。建議利用本公司的熱敏 UDG（目錄號 AE0402）進行 防止 PCR 擴增產(chan) 物的交叉汙染。

主要應用於(yu) PCR 擴增產(chan) 物的防汙染。它的作用原理基於(yu) ：在 PCR 反應中以 dUTP 替代 dTTP摻入 DNA 中，形成了含 dU 堿基的 PCR 擴增產(chan) 物，UDG 能選擇性斷裂單鏈和雙鏈 DNA 中 U堿基的糖苷鍵，降解 PCR 擴增產(chan) 物，消除上輪擴增產(chan) 物對新樣本的汙染問題。

37℃反應條件下，每分鍾催化 60 pmole 尿嘧啶堿基從(cong) 含尿嘧啶的雙鏈 DNA 上釋放所需要的酶量為(wei) 1 U。

無內(nei) 切酶活性：50 U 的本酶和 1 μg 的 pBR322 DNA 在 37℃下反應 2 小時，DNA 的電泳譜帶不發生變化。

幹冰運輸。-20℃保存，有效期2年。

為(wei) 了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作！

本產(chan) 品主要用於(yu) 科研領域，不宜用於(yu) 臨(lin) 床診斷或其他用途。

長期儲(chu) 存 ( 非頻繁使用; 每月 1-2 次 ): -70℃；每天或每周使用: -20℃。盡量避免多次凍融，切勿暴露在溫度波動較大之處。溫度波動對產(chan) 品的穩定性有極大影響。

UDG 可以在 PCR 反應前清除不慎汙染的 U－DNA 分子，對於(yu) 某個(ge) PCR 擴增反應，整個(ge) 實驗室必須在所有的 PCR 反應中添加 dUTP，使所有擴增產(chan) 物都成為(wei) U－DNA。如僅(jin) 某次 PCR 擴增反應使用 dUTP，T －DNA 仍積累，這個(ge) 抗汙染係統也難以起到wan全的作用。

UDG/dUTP 係統是 PCR 試劑專(zhuan) 用的一種防汙染措施，為(wei) 了防止 PCR 產(chan) 物的汙染，尤其是在臨(lin) 檢實驗室中反複擴增同一片段時，必須嚴(yan) 格規範實驗室的區域劃分和操作。

如果經過換房間、紫外照射、DNase 消化等措施後，依然對某個(ge) 片段存在汙染，建議在不同的擴增區重新設計引物，以錯開汙染片段。

大腸杆菌 UDG 酶的反應溫度可以在 37℃－50℃ 的範圍內(nei) 變化，建議在 37 度反應，也可根據實驗需要在 37-50 ℃範圍內(nei) 自由調整反應溫度。

為(wei) 了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作。